Bevosita antiglobulin testi (DAT, bevosita Kumbs testi), polispecifik anti-odam globulin (AHG) bilan

Polispecifik anti-odam globulin (AHG) bilan bevosita antiglobulin testi (DAT) — bevosita Kumbs testi deb ham ataladi — eritrotsitlarda yuzaga bog‘langan immunoglobulin va/yoki komplement mavjudligini baholaydi. Test immun vositachiligidagi gemoliz gumon qilinganda buyuriladi va eritrotsitlarning in vivo qoplanishini namoyish etish orqali autoimmun gemolitik anemiya tashxisini qo‘llab-quvvatlaydi. Ijobiy natijada, monospecifik anti-IgG va anti-komplement reaktivlari bilan keyingi tekshiruv bog‘langan komponentni aniqlashtiradi.

Autoimmun gemolitik anemiyalar antitanalar eritrotsit antigenlarini nishonga olganda yuzaga keladi; natijada eritrotsitlar yo qon aylanishida, yo retikuloendotelial tizimda parchalanadi. Intravaskulyar gemoliz odatda antitanalar — ko‘pincha IgM — tomonidan boshlanadigan va membranaga hujum kompleksi hosil qiladigan komplement vositasidagi shikastlanishni aks ettiradi; bunday antitanalar 4–18 °C da eng samarali bog‘lanishi sababli “sovuq” antitanalar deb ataladi. Ekstravaskulyar gemoliz IgG va/yoki C3 bilan opsonizatsiya qilingan eritrotsitlarning Fc va komplement retseptorlari orqali makrofaglar tomonidan yutilishi bilan yuzaga keladi; bunday antitanalar “issiq” deb ataladi va 37 °C da optimal bog‘lanadi. Laboratoriyada aniqlash immun gemoliz belgisi sifatida eritrotsitga bog‘langan immunoglobulin va komplement mavjudligidan foydalanadi. Autoantitanalar gemolizinlar (hujayralarni lizis qiladi) yoki agglutininlar (hujayralarni uyumlashtiradi) sifatida tutishi mumkin, va aksariyat aniqlash strategiyalari in vitro agglutinatsiyadan foydalanadi. Zamonaviy yondashuv gel agglutinatsiyasini qo‘llaydi: bemor eritrotsit suspenziyasi IgG va C3 ni tanuvchi va, shuningdek, IgA va IgM bilan ham reaksiyaga kirishishi mumkin bo‘lgan polispecifik anti-odam globulin reaktivi singdirilgan gel mavjud bo‘lgan mikronaychalarga qo‘shiladi. Sentrifugadan so‘ng, agglutinatsiyalanmagan hujayralar gelni kesib o‘tib, pastda zich cho‘kma hosil qiladi, agglutinatsiyalangan hujayralar esa gel ichida yoki uning ustida ushlanib qoladi; bu antitana va/yoki komplement bilan qoplanganligini ko‘rsatadi. Ijobiy polispecifik DAT eritrotsitlarning in vivo sensibilizatsiyasini hujjatlashtiradi, biroq bog‘langan aniq komponentni aniqlamaydi. Monospecifik reaktivlar (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-C3, anti-C3b, anti-C3c, anti-C3d va anti-C4) bilan xarakterlash talqinni aniqlashtiradi. Bevosita test faqat hujayraga bog‘langan antitanalarni aniqlaydi; aylanuvchi antitanalar zardobda mavjud bo‘lishi mumkin va bilvosita antiglobulin testi orqali baholanadi; bu test bemor zardobini donor eritrotsitlari bilan inkubatsiya qilib, so‘ng xuddi shu agglutinatsiya prinsipini qo‘llaydi.