РНК вируса гепатита C (HCV), количественное определение, ПЦР в режиме реального времени

Количественное определение РНК вируса гепатита C (HCV) методом ПЦР в режиме реального времени — также обозначаемое как вирусная нагрузка HCV или количественное определение РНК HCV — подтверждает текущую инфекцию путем демонстрации реплицирующегося вируса и предоставляет количественную исходную точку для оценки заболевания. В сочетании с генотипом HCV вирусная нагрузка помогает в прогностической оценке. Данное исследование применяется для мониторинга противовирусной терапии путем характеристики раннего снижения уровня РНК HCV в ходе лечения и определения, становится ли РНК HCV недетектируемой к окончанию терапии и после завершения лечения.

HCV — это оболочечный РНК‑содержащий вирус семейства Flaviviridae с первичным тропизмом к гепатоцитам. Внепеченочная репликация происходит в циркулирующих клетках, включая нейтрофилы, моноциты/макрофаги и B‑лимфоциты, и инфекция ассоциируется со смешанной криоглобулинемией, синдромом Шегрена и B‑клеточными лимфопролиферативными заболеваниями. Высокая скорость мутаций способствует ускользанию от иммунного ответа. Существует шесть основных генотипов и множество субтипов, различающихся по чувствительности к терапии и прогностическому значению. Передача преимущественно осуществляется парентеральным путем при контакте с кровью и ее компонентами, трансплантированными органами или нестерильными иглами и инструментами (например, татуирование, пирсинг); половой и перинатальный пути встречаются реже. Острая инфекция часто протекает бессимптомно; лишь примерно у 15% развивается острое заболевание с симптомами, такими как тошнота, миалгии, анорексия или потеря массы тела, и желтуха наблюдается нечасто. Хроническая инфекция развивается у 60%–85% инфицированных и, как правило, сопровождается умеренными повышениями активности аминотрансфераз при скудной симптоматике или ее отсутствии. Среди хронически инфицированных цирроз формируется у 20%–30% и сопряжен с повышенным риском печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы. Выявление РНК HCV указывает на активную вирусную репликацию и устанавливает диагноз текущей инфекции. РНК становится обнаруживаемой методом ПЦР приблизительно через 10–12 дней после экспозиции, предшествуя сероконверсии и нередко биохимическим отклонениям. Методы ПЦР могут быть качественными или количественными: качественные тесты подтверждают наличие реплицирующегося вируса, тогда как количественные тесты обеспечивают данные о вирусной нагрузке, используемые для мониторинга лечения и прогностической оценки. Эффективная терапия обычно ассоциируется со снижением вирусной нагрузки на ≥2 log10 в течение 4–12 недель и последующим недетектируемым уровнем РНК HCV к окончанию лечения; отсутствие раннего снижения предполагает отсутствие ответа. Тестирование рекомендуется до начала терапии, на контрольных этапах лечения (например, 4‑я, 12‑я и 24‑я недели) и после терапии; конкретные графики варьируют в зависимости от генотипа и тяжести заболевания.