Определение холодовых агглютининов (сыворотка)

Тест на холодовые агглютинины (также обозначается как холодовые аутоантитела или холодореагирующие антитела) оценивает сыворотку на наличие антител, которые при низких температурах связывают эритроциты и активируют комплемент, что приводит к гемолизу. Исследование способствует диагностике болезни холодовых агглютининов — формы аутоиммунной гемолитической анемии, обусловленной холодореактивными антителами, — и помогает различать гемолиз, опосредованный «холодными» антителами, и гемолиз «тёплыми» антителами. Результаты также направляют обследование на вторичные причины появления холодовых агглютининов, включая инфекцию Mycoplasma pneumoniae, инфекционный мононуклеоз, легионеллёз, системные аутоиммунные заболевания и лимфопролиферативные злокачественные новообразования, такие как хронический лимфоцитарный лейкоз и макроглобулинемия Вальденстрема.

Аутоиммунные гемолитические анемии возникают при нарушении иммунологической толерантности и образовании антител против собственных эритроцитов. «Тёплые» аутоантитела оптимально реагируют при 37 °C, тогда как «холодные» аутоантитела наилучшим образом связываются примерно при 4–18 °C. Функционально антитела могут проявлять себя как гемолизины, лизирующие клетки, или как агглютинины, способствующие склеиванию эритроцитов. Болезнь холодовых агглютининов представляет собой относительно редкий вариант иммунного гемолиза и составляет около 20% случаев аутоиммунной гемолитической анемии. Она может быть идиопатической — чаще встречается у пожилых взрослых (60–80 лет) — или вторичной. Вторичные формы наблюдаются у детей и молодых взрослых, часто на фоне инфекции Mycoplasma pneumoniae, инфекционного мононуклеоза или легионеллёза, и могут сопровождать системные аутоиммунные состояния, такие как системная красная волчанка и ревматоидный артрит. У лиц пожилого возраста холодовые агглютинины часто ассоциированы с лимфопролиферативными заболеваниями, включая хронический лимфоцитарный лейкоз и макроглобулинемию Вальденстрема. Холодовые агглютинины чаще всего относятся к классу IgM, хотя возможны смеси классов иммуноглобулинов. Эти антитела при низкой температуре связываются с мембранами эритроцитов и фиксируют комплемент, что приводит к формированию мембранно‑атакующего комплекса и комплемент‑опосредованному повреждению с образованием пор и разрушением клеток. В качестве лабораторного маркера опосредованного холодом гемолиза информативно выявление антител, агглютинирующих эритроциты при инкубации при низкой температуре. Современный подход использует метод гелевой агглютинации: донорские эритроциты суспендируют в нейтральном геле в микропробирках, добавляют сыворотку пациента и инкубируют смесь при 2–8 °C. После центрифугирования неагглютинировавшие эритроциты проходят через гель, формируя плотный осадок, тогда как агглютинировавшие клетки задерживаются на поверхности геля или внутри его матрикса.